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1 原 理
將試樣和對(duì)照織物分別放于三角瓶中，用含有肉湯培養(yǎng)基的試驗(yàn)菌懸液接種于試樣和對(duì)照織物上，經(jīng)培養(yǎng)后，分別將培養(yǎng)前后試樣上的細(xì)菌洗下，測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量，可計(jì)算出試樣上細(xì)菌減少的百分率。該方法適用于溶出性抗菌織物抗（抑）效果的檢測(cè)。
2 實(shí)驗(yàn)器材
（1）實(shí)驗(yàn)菌株 金黃色葡萄球菌（ATCC 6538）
（2）試樣 在距試樣布邊 10cm 以上、離布端 1m 以上部位，剪取直徑為 5cm 的圓形試樣若干（需用試樣數(shù)量要根據(jù)纖維類(lèi)別及織物織法而定，以能吸收1ml 菌液且三角瓶中不留殘液為度）。另同法剪取對(duì)照織物若干，取 3 份試樣和 2 份對(duì)照織物分別裝于三角瓶中，蓋好瓶口，121℃ 15min滅菌備用
（3）肉湯培養(yǎng)基
（4）胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基
（5）磷酸鹽緩沖液（PBS，0.03mol/L，pH為7.2～7.4）
（6）恒溫水浴箱
（7）37℃培養(yǎng)箱
3 菌懸液的制備
用接種環(huán)將保存的菌種以劃線法接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿上，在 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h，取平皿上典型的菌落移種到含肉湯培養(yǎng)基的三角瓶中，在 37℃條件下培養(yǎng) 24h，用肉湯對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行系列稀釋?zhuān)咕鷳乙旱暮繛?1×105cfu/mL～5×105cfu/mL。
4 試驗(yàn)步驟
（1）分別取 1mL 菌懸液加在 3 份準(zhǔn)備好的三角瓶?jī)?nèi)的織物上，確保其均勻分布，且三角瓶中不留多余液，封好瓶口，以防蒸發(fā)。
（2）分別在一個(gè)盛有試樣和對(duì)照織物的三角瓶中加入 100mL 緩沖液，劇烈搖晃 1min 洗滌細(xì)菌，取 1mL 做系列1 0倍稀釋?zhuān)x適當(dāng)稀釋度以?xún)A注法接種平皿，作為“0”接觸時(shí)間樣品和對(duì)照織物上的細(xì)菌數(shù)。
（3）將另一個(gè)裝有接種試樣的三角瓶在 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 20h±2h，然后加入 100mL緩沖液，劇烈搖晃 1min 洗滌細(xì)菌，取 1mL 做系列10倍稀釋?zhuān)x適當(dāng)稀釋度以?xún)A注法接種平皿，作為試驗(yàn)組。
（4）試樣不接種菌懸液，在“0”接觸時(shí)間加入 100mL 緩沖液，劇烈搖晃 1min 取樣，接種平皿，作為陰性對(duì)照組。
（5）另取1個(gè)裝有對(duì)照織物的三角燒瓶，接種 1mL 菌懸液后，在 37℃ 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20h±2h，然后加入 100mL 緩沖液，劇烈搖晃 1min 洗滌細(xì)菌，取 1mL 做系列10倍稀釋?zhuān)x適當(dāng)稀釋度以?xún)A注法接種平皿，作為陽(yáng)性對(duì)照組。
（6）將陰性和陽(yáng)性對(duì)照樣本與試驗(yàn)組樣本一并放入 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。
（7）試驗(yàn)重復(fù)3次。
（8）結(jié)果計(jì)算
B或C或（B＋C）/2-A
抑菌率（%）= ×100
B或C或（B＋C）/2
試驗(yàn)組試樣上的細(xì)菌數(shù)； “0”接觸時(shí)間試樣上的細(xì)菌數(shù)；
“0”接觸時(shí)間對(duì)照織物上的細(xì)菌數(shù)；
如果“B”和“C”差別較大時(shí)，取較大值；如果“B”和“C”差別不大時(shí)，取平均值。
5 評(píng)價(jià)規(guī)定
“0”接觸時(shí)間對(duì)照織物的平均菌落數(shù)應(yīng)在 1×103cfu/mL～5×103cfu/mL。 陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)，陽(yáng)性對(duì)照菌數(shù)比“0”接觸時(shí)間的菌數(shù)明顯增加。 各次試驗(yàn)的抑菌率均≥50%，即判定該樣片具有抗菌作用。
6 注意事項(xiàng)
對(duì)織物進(jìn)行染菌操作時(shí)，應(yīng)確保其均勻分布，且三角瓶中不沾染或存留多余菌液。 三角瓶?jī)?nèi)的織物染菌后，應(yīng)將瓶口封好，以防液體蒸發(fā)，造成細(xì)菌死亡。
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